Elektroforese, hvad det er, hvad det er til, og hvordan det fremstilles

Elektroforese er en laboratorieteknologi udført med det formål at adskille molekyler i henhold til deres størrelse og elektriske ladning, så diagnosen af sygdomme kan stilles, proteinekspression kan verificeres eller mikroorganismer kan identificeres.

Elektroforese er en enkel og billig procedure, der anvendes i laboratorierutiner og i forskningsprojekter. I henhold til formålet med elektroforesen kan det være nødvendigt at udføre andre tests og eksamener for at nå en diagnose, f.eks..

Hvad er det til?

Elektroforese kan udføres til forskellige formål, både i forskningsprojekter og til diagnose, da det er en enkel og billig teknik. Således kan elektroforese udføres til:

Identificer vira, svampe, bakterier og parasitter, idet denne anvendelse er mere almindelig i forskningsprojekter;
Faderskabstest;
Kontroller ekspressionen af proteiner;
Identificer mutationer, idet de f.eks. Er nyttige til diagnose af leukæmi;
Analyser typerne af cirkulerende hæmoglobin ved at være nyttige til diagnose af seglcelleanæmi;
Vurder mængden af proteiner, der er til stede i blodet.

I henhold til formålet med elektroforesen kan det være nødvendigt at udføre andre komplementære tests for lægen for at fuldføre diagnosen.

Sådan gøres det

For at gøre elektroforese er det nødvendigt, at gelen, der kan være af polyacrylamid eller agarose, afhængigt af objektivet, elektroforesebuffer og kar, molekylvægtsmarkør og et fluorescerende farvestof ud over et UV- eller LED-lysudstyr, også kendt som transilluminator.

Efter tilberedning af gelen skal et specifikt objekt placeres, så brøndene fremstilles i gelen, populært kaldet kammen, og lad gelen sætte sig. Når gelen er klar, skal du bare anvende stofferne på brøndene. Til dette skal en molekylvægtsmarkør anbringes i en af brøndene, en positiv kontrol, som er det stof, der vides, hvad det er, en negativ kontrol, der garanterer reaktionens gyldighed, og prøverne, der skal analyseres. Alle prøver skal blandes med et fluorescerende farvestof, da det på denne måde er muligt at visualisere båndene på transilluminatoren.

Gelen med prøverne skal placeres i elektroforesekarret, der indeholder den specifikke pufferopløsning, og derefter tændes enheden, så der er elektrisk strøm og følgelig potentialforskel, hvilket er vigtigt for adskillelsen partikler i henhold til deres belastning og størrelse. Den elektroforetiske driftstid varierer afhængigt af formålet med proceduren og kan vare op til 1 time.

Efter den bestemte tid er det muligt at se resultatet af det elektroforetiske løb gennem transilluminatoren. Når gelen anbringes under UV- eller LED-lys, er det muligt at visualisere båndmønsteret: jo større molekylet er, jo mindre er dens migrering, tættere på brønden, mens jo lettere molekylet er, jo større er migrationspotentialet.

For at reaktionen skal valideres, skal båndene til den positive kontrol visualiseres, og intet må visualiseres i den negative kontrol, ellers er det en indikation af, at der var forurening, og hele processen skal gentages.

Typer af elektroforese

Elektroforese kan udføres til forskellige formål, og ifølge dens formål kan der anvendes flere typer gel, hvor den mest almindelige er polyacrylamid og agarose..

Elektroforese til identifikation af mikroorganismer er mere almindelig at udføres i forskningslaboratorier, men til diagnostiske formål kan elektroforese bruges til at identificere hæmatologiske sygdomme og sygdomme, der udvikler sig med stigningen i mængden af proteiner, der er de vigtigste typer af elektroforese :

1. Hæmoglobinelektroforese

Hemoglobinelektroforese er en laboratorieteknik, der udføres til at identificere de forskellige typer hæmoglobin, der cirkulerer i blodet, hvilket gør det muligt at identificere tilstedeværelsen af sygdomme relateret til hæmoglobinsyntesen. Hæmoglobintypen identificeres ved hjælp af elektroforese ved en specifik pH-værdi, ideelt mellem 8,0 og 9,0, med et mønster af bånd der verificeres, der kan sammenlignes med det normale mønster, hvilket tillader identificering af tilstedeværelsen af unormale hæmoglobiner.

Hvad det er lavet til: Hæmoglobinelektroforese udføres for at undersøge og diagnosticere sygdomme, der er relateret til hæmoglobinsyntesen, såsom seglcelleanæmi og hæmoglobin C-sygdom, ud over at være nyttige til at differentiere thalassæmi. Lær hvordan du tolker hæmoglobinelektroforese.

2. Proteinelektroforese

Proteinelektroforese er en undersøgelse, som lægen anmoder om at vurdere mængden af proteiner, der cirkulerer i blodet, og således at identificere sygdomme. Denne test udføres fra en blodprøve, der centrifugeres for at opnå plasma, den del af blodet, der blandt andet består af proteiner.

Efter elektroforese kan et mønster af bånd visualiseres og efterfølgende en graf, hvor mængden af hver fraktion af proteiner er angivet, hvilket er grundlæggende for diagnosen.

Hvad det er lavet til: Proteinelektroforese giver lægen mulighed for at undersøge forekomsten af multipelt myelom, dehydrering, skrumpeleverancer, betændelse, leversygdom, pancreatitis, lupus og hypertension i henhold til båndmønsteret og grafen præsenteret i undersøgelsesrapporten.

Forstå, hvordan det gøres, og hvordan man forstå resultatet af proteinelektroforese.